课时 2.发酵工程的无菌技术（一） 课标内容要求 核心素养 1．概述发酵工程灭菌方法及 常用的灭菌设备。 2.概述发酵工程中的无菌操作 1.生命观念：认识不同灭菌方法的灭菌原理。 器具及使用注意事项。 2.科学思维：能使用常见的灭菌设备进行灭菌。 3.概述微生物的接种和传代的 无菌技术。 一、课前自主学习 1.无菌技术包括 法有 和 、 两种。常用的消毒方法有 、 ；常用的灭菌方 。 2.用于培养皿、移液管灭菌的设备是 ，用于培养基灭菌的设备是 使用该设备灭菌一般经历的步骤有 。 ，涂布接种使用的是 3.穿刺接种使用的是 。 。用来准确移取溶液的量器是 。 4.超净工作台用 方法消毒。 方法进行，菌种保藏时常将菌种接种在 5.厌氧微生物的接种常用 并置于 的冰箱中。通常每隔 培养基上， 要重新接种一次。 二、课内探究学习 探究活动一： 阅读教材思考 1、什么叫消毒？什么叫灭菌？它们的区别是什么？ 2、完成下表： 无菌技术 化学试剂消毒 射线消毒 干热灭菌法 常用设备或物质 甲醛、氯、高锰酸钾等 适用对象 一般不用于 空气、超净工作台等 法 酒精灯等 湿热灭菌法（ 法 法） 接种时的试管口 空气过滤器 法 3、连线： 、发酵液中 的产品、超净工作台 等 探究活动二：阅读教材，了解高压蒸汽灭菌锅的构造及使用。 1、高压蒸汽灭菌锅加盖时，拧紧固定盖子的螺栓应注意什么？ 2、高压蒸汽灭菌开始前，为什么要将锅内的冷空气排尽？ 3、灭菌完毕后，为什么要待压力降为 O 时才能打开排气阀？ 讨论： 防止杂菌入侵,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提。请分析下列关于微生 物的纯培养操作,错误的是________。 ① 无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ② 干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ③ 经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温下长期保存 ④ 培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑤ 将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌 ⑥ 无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌 ⑦ 为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 探究活动三：阅读教材表述斜面接种的操作步骤。 自我检测 2 班级 姓名 一、单选题 1.下列关于无菌操作技术的说法,正确的是(　　) A.液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒 B.培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌 C.消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子 D.干热灭菌需将条件控制在 121 ℃加热 1～2 h 2.关于灭菌和消毒的理解，错误的是（ ） A．操作者的衣服和手需要严格的灭菌 B．常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法 C．化学试剂灭菌法不适用于培养基灭菌 D．过滤除菌法可用于获取无菌空气 3.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是(　　) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.在实验室中,不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 C.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境 4.高温消毒的原理是 (　　) A.每种微生物生长的最适温度是一定的 B.微生物对高温环境不适应 C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动 D.高温降低了环境中氧的浓度 5.疫情中的最美逆行者,在给患者治疗时,要充分消毒并防护,以下说法中正确的是 A.医务人员进入工作区要全身灭菌 B.接种疫苗前要对注射区域进行消毒 C.消毒与灭菌的含义本质是相同的 D.常用的消毒方法有灼烧法和高压蒸汽法 二、多选题 (　　) 6．下列关于无菌操作的说法不正确的是(　　) A.超净工作台在使用前要进行紫外线照射,以杀死物体表面和空气中的微生物 B.无菌操作是为了防止培养物被微生物污染外 C.打开含菌种的试管需通过酒精灯火焰,取出菌种后马上塞上棉塞即可 D.高压蒸汽灭菌时,到灭菌时间后,需切断电源待压力表降为零后才能打开排气阀 7.下列有关常见无菌操作的叙述,正确的是 (　　) A.用酒精擦拭双手 B.用氯气对水源消毒 C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭 三、非选题 8.在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题: (1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进 行干热灭菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点 是 。 (3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能 喷洒 。在照射前,适量 ,可强化消毒效果。 (4)水厂供应的自来水通常是经过 (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。 (5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可 能的原因是 。 参考答案 自主学习 1、消毒 灭菌 化学试剂消毒 射线消毒 干热灭菌法 湿热灭菌法 2、电热鼓风干燥箱 高压蒸汽灭菌锅 加水、装锅、加热、排气、保温保压、出锅 3、接种钍 涂布器 移液管 4、紫外线消毒 5、穿刺接种 斜面 4 度 2-3 个月 合作探究一 无菌技术 化学试剂消毒 射线消毒 干热灭菌法 干热空气灭菌 法 火焰灼烧法 湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌 法） 常用设备或物质 甲醛、氯、高锰酸钾等 紫外线、X 射线 电热鼓风干燥箱 适用对象 一般不用于 培养基 空气、超净工作台等 培养 皿、移液管等需 保持干燥的器具 酒精灯等 接种环、涂布器等 接种时的试管口 培养基等 高压蒸汽灭菌锅 空气过滤器 过滤除菌法 空气 、发酵液中 的产品、超净工作台 等 活动二 1、同时旋紧对称的两个螺栓 2、有冷空气，锅内的温度达不到灭菌需要的温度 3、压力没有降为 0 打开，锅内的液体会冲出锅，造成危害和污染。 讨论：①②⑥⑦ 自我检测 1-5：AACCB 6-7:BC ABC 8:(1)可以 (2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 (3)破坏 DNA 结构　消毒液 (4)氯气　 (5)未将锅内冷空气排尽