选修一 专项练习 微生物的培养与应用 1、如下表所示为培养某种微生物的培养基的配方，请回答： 成 分 含 量 NaN O3 3g K2HP O4 MgSO4·7H FeSO 2O 4 1.5 g 0.01 g 0.5 g (CH2 O) 琼 脂 H2O 30 g 10 g 1 000 mL （1）依物理性质，该培养基属于__________培养基。 （2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用类型是________ _。 （3）该培养基中的碳源是__________。 （4）不论何种培养基，在配好之后倒平板之前都要先进行的____ _；倒平板时，一般需冷却至________左右，并在______________ _____操作。 （5）若用该培养基培养分解尿素的细菌，应除去物质__________ __，并加入物质____________ 2、从自然界筛选嗜盐菌的一般步骤是： 采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 （1）培养嗜盐菌的菌样应从____________环境采集。 （2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条 件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培 养方法。对嗜盐产淀粉酶微生物的富集培养应选择以________为 唯一碳源的培养基，并在高盐条件下培养。在富集培养过程中， 需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触， 提高营养物质的利用率；另一方面能__________。 （3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养 的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图 A 效果的接种方法是_____________。获得图 B 效果的接种 方法是_____________，该方法在第二次划线及其后划线总是从上 次划线的末端开始的原因是___________________。 （4）采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是__________ ______________________。 3、杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫 杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀 虫脒的细菌进行了以下实验。 （1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、________、 水、无机盐四类，该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮 源，其原因是________________，从功能上讲，该培养基属于___ ____培养基。 （2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布 平板法，这两种方法在功能上的区别是_______________，此外， _____________也是测定微生物数量的常用方法。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分 解圈大说明该菌株的降解能力_______。 （4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有 灼烧灭菌、干热灭菌和________。培养基一般不使用干热灭菌的 原因是____________________。 4、小明欲从土壤中分离尿素分解菌，请回答下列问题： （1）分离并计数尿素分解菌时，需要配制以尿素为唯一氮源的__ ________ (填“固体选择”“液体鉴别”“固体鉴别”或“液体选择”)培养 基。 （2）选取 10g 土样后进行一系列稀释，分别吸取 0.1mL 的 104、105、106 倍稀释的菌液在灭菌板上进行__________接种， 接种前至少要准备__________个灭菌平板。实验结果显示：106 倍 稀释的菌液对应平板上的菌落数为 124、118、109，则每克土样 中的活菌数为________个。 （3）其他同学认为小明的实验结果偏大，可能原因是操作出现错 误。为了排除其他同学的质疑，你给小明的建议是_____________ _________________。 （4）为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在以尿素 为唯一氮源的培养基中加入_______，根据颜色变化判别。 5、植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问 题： （1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3 种 组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将______________分解 成______________。 （2）在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)染料时，CR 可与纤 维素形成________色复合物。用含有 CR 的该种培养基培养纤维素 分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。 （3）为从富含纤维素分解菌的土壤中分离获得纤维素分解菌的单 菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基： 培养基 甲 培养基 乙 酵母 无机 膏 盐 ＋ ＋ － ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 淀粉 纤维素 粉 琼脂 CR 溶 液 水 注：“＋”表示“有”，“－”表示“无”。 据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离纤维素分 解菌，原因是__________________________________________； 培养基乙________(填“能”或“不能”)用于鉴定纤维素分解菌，原因 是__________________________________________。 6、分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物 资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物 A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的 培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问 题： （1）培养基中加入的化合物 A 是_____。本实验将样品稀释涂布 到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是_________。 （2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入____ __溶液，等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会 出现_____。 （3）为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用__ ____进行接种。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时， 滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是_______________ _。（4）用三种菌株对秸秆进行处理，并在第 5 天和第 10 天对秸 秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情 况进行了测定（结果如图）。 据图分析可知，三种菌株对_____的降解作用最强。与第 5 天结果 相比，第 10 天秸秆各组分中_____的降解率变化最大。 7、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A．研究人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养 基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌（目的菌）。 （1）化合物 A 为“目的菌”生长提供_____。实验需要振荡培养， 由此推测“目的菌”的呼吸作用类型是_____。筛选该目的菌所用培 养基从物理性质上划分属于_____。 （2）若培养基需要调节 pH，则应在灭菌之_____（填“前”或 “后”）调节。 （3）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段 时间，这样做的目的是_____。 （4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可用_____法统计活 菌数目。 （5）将获得的 3 种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在 1 L 含 20 mg 有机化合物 A 的相同培养液中培养（培养液中其他营养物 质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的 时间，甲、乙、丙分别为 32 小时、45 小时、16 小时，则应选择 微生物_____（填“甲”、“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养，理由 是_____。 8、物质 W 是一种含氮有机物，会污染土壤。W 在培养基中达到 一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能 降解 W 的细菌（目标菌）。回答下列问题。 （1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是__ _______。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种 细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应 该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。 （3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要 设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源， 请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。 （4）该小组将人工合成的一段 DNA 转入大肠杆菌，使大肠杆菌 产生能降解 W 的酶（酶 E）。为了比较酶 E 与天然酶降解 W 能力 的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。 ① 在含有一定浓度 W 的固体培养基上，A 处滴加酶 E 的缓冲 液，B 处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C 处滴加________ _，三处滴加量相同。 ② 一段时间后，测量透明圈的直径。若 C 处没有出现透明圈，说 明___________；若 A、B 处形成的透明圈直径大小相近，说明___ ____。 9、 回答下列与细菌培养相关的问题。 （1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是__ ____________________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常， 制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的 pH，其原 因是________。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够” 或“不能”）生长，原因是______________________________。 （2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置” 或“正置”）。 （3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的 形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是___ _____________________________________。 （4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_________________ 处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。 【参考答案】 1、【答案】（1）固体 （2）异养型 （4）灭菌 （5）NaNO3 （3）(CH2O) 50 ℃ 酒精灯火焰附近 尿素 【解析】（1）该培养基的配制使用了凝固剂琼脂，依物理性质属 于固体培养基。（2）根据题目所给的培养基配方，所培养微生物 生长所需的碳源是有机碳源(CH2O)可推知，其同化作用类型是异 养型。（3）根据培养基的配方，该培养基中的碳源是(CH2O)。 （4）培养基在配好之后倒平板之前，都要先灭菌，防止杂菌污染 ； 倒平板时温度以触摸装有培养基的锥形瓶刚刚不烫手为宜，即需 冷却至 50 ℃左右；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应 在酒精灯火焰附